Desenvolvimento de imunossensor para leishmania infantum explorando ressonância de plásmon de superficie

Abstract

O presente trabalho descreve o desenvolvimento de um imunossensor para a detecção de anticorpos de anti-Leishmania infantum explorando a Ressonância Plásmons de Superfície (SPR) como sistema de transdução. O sensor foi produzido através da imobilização do antígeno de Leishmania infantum sobre a monocamada auto organizada (SAM) mista confeccionada a partir do ácido 11-mercaptoundecanóico (11-MUA) e do ácido 3-mercaptopropiônico (3-MPA). A SAM mista foi ativada por uma mistura contendo 100 mmol L-1 do 1-etil-3-(3-dimetilaminopropil) carbodiimida (EDC) e 150 mmol L-1 de N-hidroxisuccinimida (NHS). O imunossensor desenvolvido foi caracterizado eletroquimicamente por voltametria cíclica (VC), microscopia eletroquímica de varredura (SECM), dessorção redutiva (DR) e espectroscopia de impedância eletroquímica (EIE). Adicionalmente, os efeitos da concentração do antígeno, tempo de imobilização e composição da SAM mista sobre a quantidade de antígenos imobilizados foram avaliados. Observou-se que o emprego de uma monocamada mista de 11-MUA e 3-MPA (na proporção de 1:1) para o recobrimento da superfície do eletrodo resultou em uma interação efetiva entre a SAM previamente ativada e os antígenos de Leishmania infantum. A investigação do processo de interação antígeno – anticorpo Leishmania infantum deixou evidente que o imunossensor confeccionado apresenta boa sensibilidade (△SPR / mo = 15,20 + 10551 [fator de diluição]), comportamento linear no intervalo de diluições compreendido entre 1:40 a 1:1280 e coeficiente de correlação de 0,998. A partir dos resultados obtidos, fica evidente que o imunossensor desenvolvido é sensível, rápido, simples e de fácil execução apresentando grande potencialidade para o diagnóstico sorológico de anticorpos L. Infantum.