Potencial antimalárico das folhas de Chenopodium ambrosioides L.

Abstract

A malária continua sendo uma das doenças causadas por protozoários de maior impacto mundial, especialmente quando causada por Plasmodium falciparum. Esta espécie é responsável pelo maior número de casos graves e mortes. Devido à crescente resistência do parasito aos tratamentos-padrão, a busca por novas alternativas terapêuticas é impreterível. Chenopodium ambrosioides L. (Amaranthaceae), popularmente conhecida como “mastruz”, tem efeito plasmodicida in vitro e também uma significativa atividade imunomoduladora. Baseado nisso, o objetivo deste trabalho foi investigar o potencial antimalárico do extrato bruto hidroalcoólico das folhas de Chenopodium ambrosioides (EBH) em modelos experimentais in vitro e in vivo. Primeiramente, para avaliar afinidade de ligação do EBH a proteínas totais de hemácias infectadas por P. falciparum, um ensaio de ressonância plasmônica de superfície (RPS) foi realizado. Os parasitos foram mantidos em cultura e, após serem sincronizados em fase de anel, as proteínas totais foram quantificadas pelo método de Bradford (150 µg/mL) e utilizadas como ligante no ensaio de RPS. Por outro lado, o EBH e a cloroquina foram utilizados como analitos, nas concentrações de 25, 50 e 100 µg/mL. Em seguida, culturas sincronizadas em fase de anel de P. falciparum 3D7 foram expostas a concentrações crescentes (7,8, 15,62, 31,25, 62,5, 125 e 250 µg/mL) do EBH durante 48 horas a fim de testar o efeito plasmodicida in vitro do extrato. Após esse tempo, a parasitemia foi determinada com esfregaços corados com Giemsa e foi calculada a CI50 do extrato. Finalmente, foram realizados testes in vivo para avaliar o efeito antimalárico do EBH. Camundongos fêmeas Balb/c (8-12 semanas, 20-25 g) foram infectados por via intraperitoneal (ip.) com 104 de Plasmodium berghei ANKA-GFP. Sete dias após o inóculo, os animais foram tratados ip. com PBS (n = 5), cloroquina (45mg/kg; n = 5) ou EBH (5 mg/kg; n = 6), durante 3 dias consecutivos. A parasitemia dos animais foi quantificada por citometria de fluxo no 6º, 9º e 11º dias pós infecção e a sobrevida foi acompanhada até o 21º dia. Os resultados mostraram que a afinidade de ligação do EBH às proteínas totais de hemácias infectadas foi maior do que a observada para a cloroquina, em todas as concentrações analisadas. Além disso, o extrato foi capaz de inibir in vitro o crescimento parasitário de forma dose-dependente com CI50 de 25,4 µg/mL. In vivo, o tratamento terapêutico com o EBH foi capaz de aumentar a sobrevida, com um aumento na expectativa de vida (ILS) de 33%, e de reduzir a carga parasitária dos animais infectados. Em conclusão, o EBH teve um efeito antiplasmódico significativo, podendo ser considerado como uma alternativa para o desenvolvimento de novos antimaláricos.