Extração, identificação e caracterização parcial de lectinas com possível efeito antinutricional de leguminosas utilizadas na suplementação animal

Abstract

Fatores antinutricionais são compostos encontrados numa enorme variedade de produtos de origem vegetal, que quando ingeridas em excesso podem afetar a fisiologia dos animais comprometendo, assim, à produtividade. Dentre os antinutrientes, as lectinas se destacam como um grupo de proteínas capazes de reconhecer e ligar-se a resíduos de carboidratos presentes na superfície das microvilosidades intestinais, acarretando em lesão epitelial. Com esse trabalho objetivou-se avaliar a presença de lectinas nas espécies Parkia platycephala, Mimosa caesalpiniifolia, Pueraria montana e caracterizar parcialmente essas moléculas. As lectinas foram extraídas em três soluções de tamponamento Tris-HCl 25 mM pH 7,6 + NaCl 0,15 M; Glicina 0,1 M pH 2,6 + NaCl 0,15 M; Glicina 0,1 M pH 9,0 + NaCl 0,15 M. A presença das lectinas foi avaliada utilizando-se eritrócitos de coelho, bovino, caprino, ovino, galinha e humano. Posteriormente, as lectinas foram caracterizadas quanto ao perfil de reconhecimento a carboidrato, potencial de estabilidade em diferentes temperaturas e pH. As lectinas das espécies P. platycephala, P. montana apresentaram afinidade a hemácias de coelho, porém não reconheceram eritrócitos de outros animais. A lectina da espécie M. caesalpiniifolia apresentou grande especificidade a maioria dos eritrócitos testados, coelho, bovino, caprino, ovino e do sistema A, B, O. Porém foi incapaz de reconhecer eritrócitos de galinha. Quanto aos testes de inibição da atividade hemaglutinante por meio de diferentes carboidratos e glicoproteínas, constatou-se que para a espécie P. platycephala os carboidratos Manose e N-acetil-D-glicosamina foram capazes de inibir a atividade dessa lectina nas concentrações de 50 e 6, 25 mM respectivamente, porém a atividade hemaglutinante da lectina da espécie P. montana foi inibida apenas por D-Galactose na concentração de 12,5 mM, para a espécie M. caesalpiniifolia nenhum dos carboidratos ou glicoproteínas foram capazes de inibir a atividade hemaglutinante dessa lectina na concentração de 100 mM. Em relação à caracterização térmica, identificou-se que com a elevação da temperatura de 30 para 40 °C a lecina da P. montana perdeu 50% da atividade hemaglutinante, sendo a mesma desnaturada a 50 °C. Quanto à lectina das espécies P. platycephala e M. caesalpiniifolia, se mantiveram ativas a temperaturas mais elevadas, perdendo atividade somente aos 60 °C, 80 °C respectivamente. A caraterização por meio de diferentes pH revelou que, a lectina da espécies P. platycephala é completamente inativada em pH 4,0, 9,0, 10,0. Ao contrario, as lectinas das espécies P. montana, M. caesalpiniifolia mostraram-se mais resistentes a variações de pH. Esse trabalho permitiu a identificação de pelo menos três lectinas nas espécies forrageiras estudadas. Essas substâncias, que possivelmente exercem efeito antinutricional foram completamente inativadas por meio de diferentes temperaturas e pH, o que poderá contribuir para elucidação de estratégias capazes de remover esses compostos, aumentando o valor nutricional desses alimentos.