Estabelecimento de protocolo de cultura 3D com linhagens de células tumorais humanas e fibroblasto

Abstract

O Câncer é a denominação dada ao um conjunto doenças que se caracterizam pelo crescimento desordenado de células e pela invasão e propagação dessas células para vários tecidos e é um dos problemas de saúde mais prevalente da atualidade. Os tumores têm característica de serem tecidos altamente heterogêneos não podendo ter seu microambiente tumoral fielmente reproduzidos in vitro pelas técnicas tradicionais bidimensionais. Assim, o objetivo do trabalho foi desenvolver e estabelecer um protocolo de cultura 3D, utilizando linhagens de células tumorais humanas e linhagens de fibroblastos humanos, de modo a caracterizar inicialmente o modelo quanto ao crescimento e a viabilidade. Para isso, células de linhagens imortalizadas de fibroblastos (GM) e de células tumorais (MCF7 e HeLa) foram cultivadas em placas com o fundo revestido com agarose, forçando as células a se auto agregarem e formarem uma estrutura esferoide. Os esferoides foram medidos no quarto e sétimo dia de cultura para avaliar o crescimento e no sétimo dia foram submetidos a um ensaio de MTT para a análise da viabilidade. Dadas as condições adequadas é possível se obter uma cultura de células tumorais e de fibroblastos tridimensional. No geral, as linhagens utilizadas apresentaram características parecidas entre si no padrão de crescimento, apresentando, em menor ou maior grau, uma tendência a diminuir ao longo do tempo. A viabilidade das linhagens na cultura 3D mostrou uma boa adaptação das células ao modelo, representando que a técnica se dá como uma alternativa para ensaios futuros com um modelo que mimetiza melhor as condições biológicas dos tecidos.