Use este identificador para citar ou linkar para este item: http://hdl.handle.net/123456789/3990
Título: Caracterização química e atividade antitumoral in vitro da geoprópolis de Melipona fasciculata smith em linhagem celular de câncer de ovário
Título(s) alternativo(s): Chemical characterization and in vitro antitumor activity of Melipona fasciculata smith geopropolis in ovarian cancer cell line
Autor(es): PEREIRA, Francisco Assis Nascimento
Palavras-chave: Abelha sem ferrão
Anticâncer
Composição química
Stingless bee
Anticancer
Chemical composition
Data do documento: 25-Jun-2019
Editor: Universidade Federal do Maranhão
Resumo: Melipona fasciculata Smith, espécie nativa do Maranhão, coleta material resinoso das plantas e traz para sua colmeia, mistura com secreções salivares, cera e barro ou terra formando a geoprópolis. Estudos já demonstraram a ação antitumoral in vitro da geoprópolis contra câncer de ovário. Esta é a segunda neoplasia gincecológica mais incidente e em muitos casos é resistente ao tratamento medicamentoso. O trabalho objetiva avaliar atividade antitumoral in vitro de extrato hidroetanólico da geoprópolis de Melipona fasciculata Smith em linhagem celular de câncer de ovário (ES2) e identificar sua composição química. A geoprópolis de Melipona fasciculata foi coletada no município de Pinheiro, Maranhão. Foi extraída por maceração com etanol 70% por 48 horas, filtrada e concentrada em evaporador rotativo, sendo posteriormente liofilizada, obtendo-se o extrato hidroetanólico de geoprópolis de Pinheiro (EHGP). Foram quantificados polifenóis e flavonoides totais. Avaliou-se a atividade antioxidante pelo método DPPH (2,2-difenil-1-picril-hidrazil) e FRAP (Poder antioxidante de redução férrica). A composição química foi avaliada por cromatografia em camada delgada (CCD), cromatografia liquida de alta eficiência acoplada a detector de ultravioleta visível (CLAE/UV-Vis) e cromatografia líquida de alta eficiência acoplada a espectrômetro de massas (CLAE/EM/EM). A citotoxicidade foi avaliada pelo teste do MTT (brometo de 3-4,5 dimetiltiazol-2,5 difenil tetrazólio). O EHGP apresentou rendimento extrativo de 12,60%, com teores de fenóis e flavonoides, respectivamente, 7,27±0,26% e 0,13±0,01%, atividade antioxidante pelo DPPH com CE50 de 265,91±0,29 𝜇g/mL e capacidade de redução férrica de 1,10±0,25 mmol Fe2+/g. A composição química por CLAE/UV-Vis demonstrou a predominância de compostos de baixa polaridade. A CCD revelou a presença de triterpenos. Foram identificados cinco compostos por CLAE/EM/EM: ácido glucônico e quatro flavonoides glicosilados: S-eriodictiol-6-C-β-D-glucopiranósideo, narigenina-C-glicosídeo, isômero da narigenina-C-glicosídeo e hesperetina-7-O-ramnosídeo. O EHGP apresentou citotoxicidade dose-dependente e tempo-dependente na linhagem tumoral de câncer de ovário (ES2). Sendo assim, a geoprópolis é um produto natural promissor na busca de moléculas bioativas com potencial anticâncer. Estudos de isolamento e identificação de biomoléculas relacionados com a atividade antitumoral e toxicológicos são necessários para determinar a segurança desse produto que pode ser uma terapia alternativa/complementar para o tratamento do câncer de ovário.
Descrição: ABSTRACT Melipona fasciculata Smith, a native species from Maranhão, collects resinous material from the plants and brings to its hive, a mixture with salivary secretions, wax and clay or earth forming the geopropolis. The objective of this work is to investigate the in vitro antitumor activity of the hydroethanolic extract of the geometry of Melipona fasciculata, the cellular molecule of ovarian cancer (ES2) and its chemical composition. The geopropolis of Melipona fasciculata was collected in the municipality of Pinheiro, Maranhão. It was extracted by maceration with 70% ethanol for 48 hours, filtered and concentrated in a rotary evaporator, and then lyophilized, obtaining the hydroalcoholic extract of Pinheiro geopropolis (EHGP). Polyphenols and total flavonoids were quantified. The antioxidant activity was evaluated by the DPPH (2,2-diphenyl-1-picryl-hydrazyl) and FRAP (Ferric Reducing Antioxidant Power) method. The chemical composition was evaluated by thin layer chromatography (CCD), high performance liquid chromatography coupled to visible ultraviolet detector (HPLC/UV-Vis) and high performance liquid chromatography coupled to mass spectrometer (HPLC/MS/MS). Cytotoxicity was assessed by the MTT (3- (4,5-dimethylthiazol-2-yl) -2,5-diphenyl-tetrizoline bromide) assay. The EHGP presented extractive yield of 12.60%, with contents of phenols and flavonoids, respectively, 7.27 ± 0.26% and 0.13 ± 0.01%, antioxidant activity by DPPH with EC50 of 265.91 ± 0,29 μg/mL and ferric reduction capacity of 1.10±0.25 mmol Fe2+/g. The chemical composition by HPLC/UV-Vis demonstrated the predominance of low polarity compounds at the retention times from 40 min. The CCD revealed the presence of triterpenes. Five compounds were identified by LC/MS/MS: gluconic acid and four phenolic compounds: S-eriodictiol-6-C-β-D-glucopyranoside, narigenin-C-glycoside, isomer of narigenin-Cglycoside and hesperetin-7-O-rhamnoside. The EHGP presented dose-dependent and timedependent cytotoxicity in the ovarian cancer tumor line (ES2). Thus, the geopropolis is a promising natural product in the search for bioactive molecules with anticancer potential. Isolation studies and identification of biomolecules related to antitumor activity and toxicology are required to determine the safety of this product which may be an alternative/complementary therapy for the treatment of ovarian cancer.
URI: http://hdl.handle.net/123456789/3990
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