Otimização do cultivo de isolados de Bacillus thuringiensis (berliner, 1911) para controle de Aedes aegypti (Linnaeus, 1762) (Diptera, Culicidae)

Abstract

RESUMO

A bactéria Bacillus thuringiensis (Berliner, 1911) considerada o patógeno de insetos de maior sucesso, é muito estudada devido suas propriedades inseticidas no controle de mosquitos vetores de doenças ao homem. Para produção de um biolarvicida a base de B. thuringiensis a partir de linhagens isoladas de diferentes ambientes, é necessário conhecer as condições de crescimento de cada linhagem, para assim, obter um bom rendimento de toxinas/proteínas inseticidas, com custo de produção reduzido. Logo, este trabalho teve por objetivo obter os parâmetros de crescimento, físicos e químicos, em laboratório para linhagens de B. thuringiensis ativas a mosquitos vetores de doenças. Dezoito combinações de pH e temperaturas foram testadas para obtenção das melhores condições de crescimento para cada um dos três melhores isolados do Banco de Bacilos Entomopatogênicos do Maranhão (BBENMA), BtMA-690, BtMA-750 e BtMA-1114. Para comprovação das melhores condições de crescimento foi realizada a quantificação do inóculo para obtenção da concentração de esporos/mL e a determinação da massa celular (g/L). Foram utilizadas em bioensaios com larvas de Aedes aegypti (Linnaeus, 1762), para confirmação de toxicidade, as CL50 dos três isolados cultivados nas condições extremas de temperatura (26 °C e 36 °C) com os pH (6,0, 7,0 e 8,0), assim como, as duas melhores condições de crescimento de cada isolado. Os isolados BtMA-690 e BtMA-750 mostraram melhores condições de crescimento nas combinações de 34 °C com pH 8,0 para concentração de esporos/mL e 30 °C com pH 6,0 para massa celular, enquanto, o BtMA-1114 apresentou crescimento mais satisfatório na temperatura de 28 °C com

pH 7,0 para concentração de esporos/mL e 34 °C com pH 6,0 para massa celular. Para BtMA- 690, verificou-se que das condições extremas a maior mortalidade encontrada foi de 35% até

72 horas, obtida da combinação 26 °C com pH 6,0. Observou-se ainda, mortalidade inferior a

20% para as melhores condições de massa celular e concentração de esporos/mL. Para o BtMA- 750 houve mortalidade acima de 90% com 72 horas de experimento, para quase todas as

condições extremas, assim como, para as melhores condições de crescimento para massa celular e concentração de esporos/mL. Por outro lado, para o BtMA-1114, nas condições extremas a maior mortalidade foi 14% com 72 horas, obtida somente para a combinação 36 °C com pH 7,0 e inferior a 10% e 40% para as melhores condições de crescimento para massa celular e concentração de esporos/mL, respectivamente. Os resultados encontrados possibilitarão melhorar as atividades de controle de larvas de mosquitos, promovendo a produção de inseticidas biológicos de baixo custo, por meio da otimização do crescimento das linhagens de B. thuringiensis em laboratório.