Obtenção de extratos enzimáticos com capacidade amilolítica obtidos a partir de fungos isolados de beijus de mandioca embolorados

Abstract

O presente trabalho teve por objetivo obter extratos enzimáticos capazes de degradar biomassas que contenham amido. Os extratos foram obtidos a partir de fungos isolados de beijus de mandioca embolorados. O cultivo e isolamento dos fungos foi realizada por meio da técnica de diluição seriada do caldo do beiju embolorado e semeio em meio de cultura. No total foram isolados cinco fungos filamentosos sendo eles, o Aspergillus niger, Aspergillus flavus, Scopulariopsis sp., Rhizopus sp. e Penicillium sp.. As linhagens foram analisadas quanto a produção de amilase a partir de ensaio amilolítico utilizando Lugol como indicador. Todos os fungos isolados se mostraram capazes de produzir enzimas amilolíticas, sendo que Aspergillus niger, Aspergillus flavus e Scopulariopsis sp. apresentaram maior halo de degradação indicando que possuem maior produção de amilases. Extratos enzimáticos dos fungos isolados foram então obtidos pelo processo de fermentação em estado solido. As proteínas totais dos extratos foram quantificadas pelo método de Bradford. Os extratos que apresentaram maior quantidade de proteínas foram os do Aspergillus niger com 0,9 mg/ml, do Penicillium sp. com 0,7 mg/ml e do Scopulariopsis sp. com 0,59 mg/ml. Para se analisar a presença de amilase nos extratos foi realizado um ensaio de hidrólise utilizando amido gelatinizado, o extrato enzimático obtido e Lugol como indicador da degradação do amido. Observou-se grande descoloração pelo extrato do Aspergillus niger, pequena descoloração pelo Penicillium sp. e descoloração intermediaria pelas demais linhagens. A quantificação dos açucares redutores produzida pelo extrato enzimático de cada fungo foi realizada pelo método de Miller (DNS). As maiores concentrações de açucares redutores foram produzidas pelos extratos de Aspergillus niger (0,9 g/L), Aspergillus flavus (0,6 g/L) e Scopulariopsis sp. (0,5 g/L). Dessa forma, os fungos isolados demonstraram capacidade de degradação de materiais contendo amido, uma vez que, são produtores de amilase.